Sequenziamento mediante ibridazione

Il sequenziamento di hybridization è un'operazione non enzimatica che utilizza un DNA microarray. Un singolo pool di DNA la cui concatenazione deve essere determinata viene etichettato in modo fluorescente e ibridato in un array contenente sequenze note. I forti segnali hybridization provenienti da un dato punto dell'array identificano la sua concatenazione nel DNA che viene sequenziato.

Questa operazione di sequenziamento utilizza le caratteristiche di legame di una libreria di molecole corte a filamento singolo DNA (oligonucleotidi), in modo simile chiamate sonde DNA, per ricostruire una concatenazione oggettiva DNA. Gli ibridi non specifici vengono rimossi mediante lavaggio e l'obiettivo DNA viene eluito. Gli ibridi vengono riorganizzati in modo tale che la concatenazione DNA possa essere ricostruita. Il vantaggio di questo tipo di sequenziamento è la sua capacità di catturare un gran numero di bersagli con una copertura omogenea. DNA Normalmente è richiesto un gran numero di sostanze chimiche e l'avvio DNA. In ogni caso, con l'avvento della soluzione hybridization, sono necessarie molte meno attrezzature e prodotti chimici.

Immagine 153A | Sequenziamento del template TAGGCT con IonTorrent, PacBioRS e GridION | Philippe Hupé / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:From_second_to_fourth-generation_sequencing,_illustration_on_TAGGCT_template.svg) da Wikimedia Commons

Immagine 153A | Sequenziamento del template TAGGCT con IonTorrent, PacBioRS e GridION | Philippe Hupé / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:From_second_to_fourth-generation_sequencing,_illustration_on_TAGGCT_template.svg) da Wikimedia Commons

Author : Milos Pawlowski

References:

Molecular Biology Techniques I

Techniques of Molecular Biology II

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