La microscopia multifotone a campo ampio si riferisce a una tecnica di imaging ottico non lineare in cui una vasta area dell'oggetto viene illuminata e visualizzata senza necessità di scansione. Sono necessarie intensità elevate per indurre processi ottici non lineari come illustrato dalla fluorescenza a due fotoni o dalla generazione di seconda armonica. Nei microscopi multifotone a scansione le alte intensità si ottengono focalizzando strettamente la luce e l'immagine si ottiene mediante scansione a fascio. Nelle alte intensità si ottengono meglio utilizzando una sorgente laser pulsata otticamente amplificata per ottenere un ampio campo visivo (~ 100 µm). L'immagine in questo caso è ottenuta come un singolo fotogramma con una camera CCD senza necessità di scansione, rendendo la tecnica particolarmente utile per visualizzare processi dinamici simultaneamente attraverso l'oggetto di interesse.Con il frame rate può essere aumentato fino a 1000 volte rispetto alla microscopia a scansione multifotone. Nella dispersione dei tessuti, anche se, la qualità dell'immagine degrada rapidamente con l'aumentare della profondità.
Immagine 377A | Vista dall'alto di un modulo di esposizione ai mammiferi Vitrocell "robot fumante", (coperchio rimosso) vista di quattro pozzetti separati per inserti di colture cellulari da esporre al fumo di tabacco o ad un aerosol per uno studio in vitro degli effetti | Jason Adamson, David Thorne, Annette Dalrymple, Debbie Dillon e Clive Meredith / Attribution 2.0 Generic | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Vitrocell_mammalian_exposure_module-smoking_robot.jpg) da Wikimedia Commons
Author : Nikolas Morein
References:
Medical Microbiology II: Sterilization, Laboratory Diagnosis and Immune Response
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